Generation of transgenic tobacco pl

Generation of transgenic tobacco plants The full-length coding region of lima bean (E)-b-ocimene synthase (PlOS; EU194553) was inserted into the GFP reporter gene site of the binary vector pSMABR35SsGFP in which the selectable marker bar gene was replaced by a hygromycin phosphotransferase gene (hpt). The resulting plasmid, pSMAH-PlOS, was transformed into Agrobacterium tumefaciens strain EHA101 by electroporation. Tobacco (Nicotiana tabacum L. cv. SR1) plants that were aseptically grown from seeds for about 1 month were transformed via an A. tumefaciens-mediated leaf disc procedure, and selected using a medium containing 30 mg l21 hygromycin. After rooting and acclimatization, the regenerated plants were grown in a closed greenhouse to set seeds. Sixteen lines of transgenic T1 seeds were tested for germination on 1/2 Murashige and Skoog medium supplemented with 30 mg l21 hygromycin. T2 seeds harvested from each T1 individual plant that showed ca. 3:1 segregation ratio were tested for hygromycin- resistance again. Finally, four homozygous T2 plant lines were used in further assays.

結果 (繁體中文) 1:

一代的轉基因煙草植物全長編碼區的利馬豆 (E)-b-羅勒烯合酶 (PlOS;EU194553) 被插入到二進位向量 pSMABR35SsGFP 在其中選擇標記 bar 基因被取而代之的潮黴素磷酸轉移酶基因 (hpt) GFP 記者基因網站。由此產生的質粒，pSMAH-PlOS，通過電穿孔轉化為桿菌 EHA101。約 1 個月被從種子無菌生長的煙草 (煙草煙草 L.品種 SR1) 植物 A.農桿菌介導的葉盤過程中，通過改變了，而且選擇使用含 30 毫克 l21 潮黴素的介質。後生根和馴化，再生的植物生長在封閉的溫室裡設置種子。十六行的轉基因 T1 種子萌發 1/2 村蕃和斯庫格培養基上 30 毫克 l21 潮黴素進行了測試。從每個 T1 的單株表明片約 3:1 分離比例進行了潮黴素抗再次收穫的 T2 種子。最後，四個純合子的 T2 植物線進行進一步檢測。

結果 (繁體中文) 2:

轉基因煙草植物的全長編碼利馬豆的區域（E）-b羅勒烯合酶代（PLOS; EU194553）插入到二元載體pSMABR35SsGFP的GFP報告基因位點，其中可選擇標記bar基因被替換潮黴素磷酸轉移酶基因（HPT）。所得質粒，pSMAH-PLOS，轉化至農桿菌通過電農桿菌菌株EHA101。煙草（煙草屬栽培品種SR1），該無菌從種子生長約1個月的植物轉化通過根癌農桿菌介導的葉盤程序，並使用含有30mg L21潮黴素的培養基中選擇。生根和馴化後，將再生的植物生長在封閉的溫室設置種子。十六行轉基因T1種子分別在補充30毫克L21潮黴素1/2 MS培養基檢測發芽。從顯示大約每個T1單株收穫T2種子 3：1的分離比再次測試潮黴素抗性。最後，4純合的T2植物品系中進一步測定法使用。

結果 (繁體中文) 3:

轉基因烟草植物利馬豆全長編碼區代（E）- b-ocimene合成酶（PLoS；eu194553）插入到雙元載體psmabr35ssgfp中選擇標記基因bar的潮黴素磷酸轉移酶基因取代GFP報告基因位點（HPT）。得到的質粒，psmah PLoS，電穿孔轉化農桿菌EHA101。烟草（Nicotiana tabacum L. cv。SR1），從1個月左右種子無菌條件下生長的植物通過根癌農桿菌介導的葉盤的程式轉換，並使用含有30 mg L21潮黴素中選擇。在生根和馴化，在一個封閉的溫室中生長的植物，設定種子。轉基因T1代種子十六線測試的1 / 2的Murashige和Skoog培養基與30 mg L21潮黴素的萌發。T2種子收穫的每一個T1株顯示約3:1的分離比進行潮黴素抗性再。最後，四純合子T2植物系進行進一步的分析。