Figure 2 Mre11 controls CtIP phosph

Figure 2 Mre11 controls CtIP phosphorylation in normally dividing cells. Western blot analyses with primary antibodies indicated at left. Tubulin used as protein loading control. Endogenous and cDNA Mre11 alleles (top) are as described in the text and Figure 1 legend. (a) Proteasome inhibition restores CtIP levels in the absence of MRN. MEFs were untreated (−) or treated (+) with MG-132 for 8 h. (b) CtIP phosphorylation depends on the Mre11 C terminus. MEFs of the indicated genotypes (top) were untreated (−) or treated (+) with MG-132 for 8 h. Extracts were subsequently untreated (−)
or treated (+) with lambda phosphatase. Phosphorylated (CtIPP)
and hypophosphorylated (CtIP) forms of CtIP on the western blot are indicated (left). (c) BRCA1–CtIP complex formation depends on the Mre11 C terminus. Western blot of coimmunoprecipitates using anti-BRCA1 antibody (IP) or beads only (M). Three percent of the lysate is shown for comparison (I). Phosphorylated (CtIPP) and hypophosphorylated (CtIP) forms of CtIP are indicated (left). (d) CtIP levels are influenced by CDK2. Wild-type (+/+) or CDK2 knockout (−/−) MEFs were untreated (−) or treated with 10 μM of the CDK inhibitor roscovitine (+) for 48 h.

結果 (繁體中文) 1:

圖 2 Mre11 控制 CtIP 磷酸化在正常分裂的細胞。與主要抗體的免疫印跡分析表明在左邊。微管蛋白用作蛋白質載入控制項。內在和 cDNA Mre11 等位基因 (頂部) 是文本和圖 1 傳說中所述。(a) 蛋白酶體抑制恢復 CtIP 水準 MRN 缺席。小鼠被未經處理 (−) 或 8 h.(b) CtIP 磷酸化取決於 Mre11 C 總站 132 毫克治療 (+)。表明基因型 (頂部) 的小鼠被未經處理 (−) 或治療 (+) 毫克 132 8 h.提取物為隨後未經處理 (−)或與 lambda 磷酸酶處理的 (+)。磷酸化 (CtIPP)並指出 (左) hypophosphorylated (CtIP) 形式的 CtIP 上的印跡。(c) brca1 基因 — — CtIP 複雜的形成取決於 Mre11 C 總站。Coimmunoprecipitates 使用反 brca1 基因抗體 (IP) 或珠只 (M) 的免疫印跡。裂解的 3%是比較 (I) 所示。磷酸化 (CtIPP) 和 hypophosphorylated (CtIP) 形式的 CtIP (左) 表示。(d) CtIP 水準受 CDK2。野生型 (+ +) 或 CDK2 淘汰賽 (−/−) 小鼠是未經處理的 (−) 或處理 10 μ M 的激酶抑制劑系列 (+) 為 48 小時。

結果 (繁體中文) 2:

圖2 MRE11控制在正常分裂的細胞CtIP磷酸化。蛋白質印跡分析與在左側顯示主抗體。微管蛋白用作蛋白負荷控制。內源性和cDNA MRE11等位基因（頂部）是如文中和圖1說明中描述。（一）蛋白酶抑制恢復CtIP水平在缺少MRN的。的MEF是未處理（ - ）或處理過的（+）與MG-132 8小時。（二）CtIP磷酸化依賴於MRE11 C端。所指示的基因型（頂部）的MEF不處理（ - ）或處理過的（+）與MG-132 8小時。萃取物隨後未處理（ - ）
或處理過的（+）與拉姆達磷酸酶。磷酸化（CtIPP）
和西部印跡低磷酸（CtIP）形式CtIP的指示（左）。（三）的BRCA1 CtIP複合物的形成取決於MRE11 C末端。使用抗BRCA1抗體（IP）或珠只（M）的免疫共沉澱Western印跡。三成的裂解物示出用於比較（Ⅰ）。磷酸（CtIPP）和低磷酸（CtIP）形式CtIP的指示（左）。（四）CtIP水平由CDK2影響。野生型（+ / +）或CDK2敲除（ - / - ）的MEF不處理（ - ）或用10μM的CDK抑制roscovitine處理（+），48小時的處理。

結果 (繁體中文) 3:

圖2 MRE11控制CtIP磷酸化正常分裂的細胞。左，原抗體的免疫印迹分析。微管蛋白作為蛋白質的負載控制。內源性基因MRE11基因（上）是在文字和圖1描述的傳說。（一）蛋白酶體抑制劑恢復MRN缺席CtIP水准。與未處理組（−）或治療（8 h）與作用（b）CtIP取決於Mre11 C末端磷酸化。這表明基因型（上）與未處理（−）或治療（）和8 h（−提取物MG-132隨後被未經處理或處理）
lambda磷酸酶（）。（ctipp）
磷酸化和去磷酸化（CTIP）表示在Western blot CtIP形式（左）。（C）BRCA1–CtIP複合體的形成取決於Mre11 C端。西方用抗BRCA1抗體coimmunoprecipitates印迹（IP）或珠只有（M）。該裂解百分之三顯示的比較（一）。（ctipp）的磷酸化和去磷酸化（CTIP）表示形式的CTIP（左）。（d）CtIP CDK2水准的影響。野生型（/）或CDK2基因敲除（−/−）與未處理（−）或經10μm的CDK抑制劑roscovitine（）為48小時。