BACKGROUND AND PURPOSEIntermedin is

BACKGROUND AND PURPOSE
Intermedin is a member of the calcitonin gene-related-peptide (CGRP) family expressed in endothelial cells and acts via
calcitonin receptor-like receptors (CLRs). Here we have analysed the receptors for intermedin and its effect on the endothelial
barrier in monolayers of human umbilical vein endothelial cells (HUVECs).
EXPERIMENTAL APPROACH
We analysed the effect of intermedin on albumin permeability, contractile machinery, actin cytoskeleton and VE-cadherin in
cultured HUVECs.
KEY RESULTS
Intermedin concentration-dependently reduced basal endothelial permeability to albumin and antagonized thrombin-induced
hyperpermeability. Intermedin was less potent (EC 50 1.29 ? 0.12 nM) than adrenomedullin (EC 50 0.24 ? 0.07 nM) in
reducing endothelial permeability. These intermedin effects were inhibited by AM 22–52 and higher concentrations of aCGRP 8–37 ,
with pA 2 values of aCGRP 8–37 of 6.4 for both intermedin and adrenomedullin. PCR data showed that HUVEC expressed only
the CLR/RAMP2 receptor complex. Intermedin activated cAMP/PKA and cAMP/Epac signalling pathways. Intermedin’s effect
on permeability was blocked by inhibition of PKA but not of eNOS. Intermedin antagonized thrombin-induced contractile
activation, RhoA activation and stress fibre formation. It also induced Rac1 activation, enhanced cell–cell adhesion and
antagonized thrombin-induced loss of cell–cell adhesion. Treatment with a specific inhibitor of Rac1 prevented
intermedin-mediated barrier stabilization.
CONCLUSION AND IMPLICATIONS
Intermedin stabilized endothelial barriers in HUVEC monolayers via CLR/RAMP2 receptors. These effects were mediated via
cAMP-mediated inactivation of contractility and strengthening of cell–cell adhesion. These findings identify intermedin as a
barrier stabilizing agent and suggest intermedin as a potential treatment for vascular leakage in inflammatory conditions.
Abbreviations
AJ , adherens junctions ; CGRP , calcitonin gene related peptide ; CLR , calcitonin receptor-like receptor ; Epac , exchange
protein directly activated by cAMP ; HUVEC , human umbilical vein endothelial cells ; L-NAME , N G -nitro-L-Arginine
methyl ester ; L-NNA , N G -nitro-L-Arginine ; MLCs , myosin light chain ; MLCK , myosin light chain kinase ; MLCP myosin
light chain phosphatase ; RAMP , receptor activity modifying protein ; Rock , Rho kinase

結果 (中文) 1:

背景和目的中介素是在血管内皮细胞中表达降钙素基因相关肽 （CGRP） 家族的成员，并通过行为降钙素受体样受体 (CLRs)。在这里我们有分析的受体为中介素及对血管内皮的影响屏障的单分子膜的人脐静脉内皮细胞 （Huvec）。实验性的方法我们分析了中介素对白蛋白通透性、 收缩机械、 肌动蛋白细胞骨架和 VE-钙粘蛋白的影响体外培养的脐。主要成果中介素浓度依赖地降低了基底内皮通透性与白蛋白和拮抗凝血酶诱导通透。中介素是不那么有力 (EC 50 1.29 吗？ 0.12 nM） 比肾上腺髓质素 （EC 50 0.24 吗？ 0.07 毫微米） 在减少内皮细胞的通透性。这些中介素影响被抑制的 AM 22 — — 52 和更高的浓度的 aCGRP 8 — — 37pA 2 值为 aCGRP 8 — — 37 6.4 为中介素及肾上腺髓质素。聚合酶链反应数据显示血管内皮细胞表达只CLR/RAMP2 受体复合物。中介素激活营/PKA 和营地/艾派克信号通路。中介素的影响对渗透率堵住了抑制 PKA 的而不是以挪士。中介素拮抗凝血酶诱导收缩激活、 RhoA 激活和应力纤维形成。它还诱导 Rac1 活化、 增强的细胞-细胞粘附和对抗的凝血酶诱导的细胞-细胞粘附损失。Rac1 阻止特定的抑制剂治疗中介素介导的屏障稳定。结论和所涉问题中介素稳定通过 CLR/RAMP2 受体血管内皮细胞单层内皮屏障。这些影响是通过介导的。cAMP 介导失活的收缩力和加强细胞-细胞粘附。这些研究结果确定作为中介素稳定剂的屏障和建议中介素作为一种潜在治疗炎症条件下血管渗漏。缩写AJ，黏着路口 ；CGRP，降钙素基因相关肽 ；CLR，降钙素受体样受体 ；艾派克交换蛋白质直接激活的营地 ；血管内皮细胞，人脐静脉内皮细胞 ；L-精氨酸、 N G-硝基-L-精氨酸甲基酯 ；L-硝基精氨酸、 N G-硝基-L-精氨酸 ；Mlc，肌球蛋白轻链 ；MLCK，肌球蛋白轻链激酶 ；MLCP 肌球蛋白轻链磷酸酶;舷梯，受体活性修饰蛋白 ；Rho 激酶的岩石

結果 (中文) 3:

背景与目的
IMD是降钙素基因相关肽（CGRP）家族成员，表达于内皮细胞和行为通过
降钙素受体样受体（CLRS）。在这里，我们已经分析了IMD对人脐静脉内皮细胞单层内皮
屏障效果受体（HUVECs）

实验方法。我们分析了白蛋白的通透性，促黑素细胞影响的收缩机械，肌动蛋白细胞骨架和在培养的人脐静脉内皮细胞VE-cadherin

。关键结果
IMD浓度依赖性地减少基底内皮细胞通透性白蛋白和对抗凝血酶诱导
通透性。IMD是弱（EC 50 1.29？0.12 nm）比肾上腺髓质素（EC 50 0.24？0.07 nm）在
降低内皮细胞通透性。这些中介素效果是由AM 22–52和较高浓度的ACGRP 8–
37抑制，为IMD和肾上腺髓质素的ACGRP 8–37 6.4 pA 2值。PCR数据表明HUVEC表达
CLR / RAMP2受体复合物。促黑素细胞激活cAMP／PKA和cAMP / EPAC信号通路。促黑激素的作用
对渗透性被抑制PKA但不是eNOS。中介素拮抗凝血酶诱导的收缩
活化，活化RhoA和应力纤维的形成。它也诱导Rac1的激活，增强细胞的粘附和细胞–
拮抗凝血酶诱导的细胞粘附损失–。与一个特定的抑制剂的治疗防止中介素介导的Rac1

屏障稳定。结论和启示意义
稳定在人脐静脉内皮细胞单层内皮屏障通过CLR / RAMP2受体。这些效果是通过cAMP介导的失活
收缩和细胞–细胞粘附增强。这些调查结果确定IMD为
屏障稳定剂和建议IMD为炎症性疾病的潜在治疗
血管渗漏。缩写
AJ，粘着路口；CGRP，降钙素基因相关肽；CLR，降钙素受体样受体；EPAC
，交换蛋白直接激活受cAMP；人脐静脉内皮细胞，人脐静脉内皮细胞；L-NAME，NG-硝基-L-精氨酸甲基酯
；L-NNA，NG-硝基-L-精氨酸；MLC，肌球蛋白轻链肌球蛋白轻链激酶，；肌球蛋白轻链激酶；MLCP肌球蛋白
轻链磷酸酶；斜坡，受体活性修饰蛋白；岩，Rho激酶