NAD1 use is an ancestral trait of i

NAD1 use is an ancestral trait of isocitrate dehydrogenase (IDH), and the NADP1 phenotype arose through
evolution as an ancient adaptation event. However, no NAD1-specific IDHs have been found among type II
IDHs and monomeric IDHs. In this study, novel type II homodimeric NAD-IDHs from Ostreococcus
lucimarinus CCE9901 IDH (OlIDH) and Micromonas sp. RCC299 (MiIDH), and novel monomeric
NAD-IDHs from Campylobacter sp. FOBRC14 IDH (CaIDH) and Campylobacter curvus (CcIDH) were
reported for the first time. The homodimeric OlIDH and monomeric CaIDH were determined by size
exclusion chromatography and MALDI-TOF/TOF mass spectrometry. All the four IDHs were
demonstrated to be NAD1-specific, since OlIDH, MiIDH, CaIDH and CcIDH displayed 99-fold, 224-fold,
61-fold and 37-fold preferences forNAD1 overNADP1, respectively. The putative coenzyme discriminating
amino acids (Asp326/Met327 in OlIDH, Leu584/Asp595 in CaIDH) were evaluated, and the coenzyme
specificities of the two mutants, OlIDH R326H327 and CaIDHH584R595, were completely reversed from NAD1
to NADP1. The detailed biochemical properties, including optimal reaction pH and temperature,
thermostability, and metal ion effects, of OlIDH and CaIDH were further investigated. The evolutionary
connections among OlIDH, CaIDH, and all the other forms of IDHs were described and discussed
thoroughly.

結果 (繁體中文) 1:

NAD1 使用異檸檬酸脫氫酶 (IDH)，一種祖先特徵，並通過產生的 NADP1 型作為古代適應事件的演變。然而，第二類群中已發現沒有特定的 NAD1 IDHsIDHs 和單體 IDHs。在此研究中，新型二同源 NAD IDHs 從 Ostreococcuslucimarinus CCE9901 IDH (OlIDH) 和 Micromonas sp。 RCC299 (MiIDH) 和單體的小說NAD IDHs 從空腸彎曲菌 sp。 FOBRC14 IDH (CaIDH) 和空腸彎曲菌 curvus (CcIDH)第一次報導。確定了大小的同源 OlIDH 和單體 CaIDH排阻色譜法和 MALDI-TOF/TOF 質譜。所有四個 IDHs 了結果表明了其特定的 NAD1，OlIDH、 MiIDH、 CaIDH、 CcIDH 99-fold、 224-fold，顯示自61-fold 和 37-fold 的偏好 forNAD1 overNADP1，分別。假定輔酶歧視氨基酸 (Asp326/Met327 在 OlIDH、 Leu584/Asp595 在 CaIDH) 進行了評價，和輔酶兩個突變，OlIDH R326H327，CaIDHH584R595，特點是徹底扭轉從 NAD1到 NADP1。詳細的生化特性，包括最適反應 ph 值和溫度，進一步研究了熱穩定性及金屬離子影響，OlIDH 和 CaIDH。進化OlIDH、 CaIDH 和 IDHs 的所有其他表單之間的連接進行了描述和討論徹底。

結果 (繁體中文) 2:

NAD1使用的是異檸檬酸脫氫酶（IDH）的祖先特徵，並通過NADP1表型出現
變化作為一個古老的適應活動。然而，沒有NAD1特異性IDHs已發現II型之間
IDHs和單體IDHs。在這項研究中，新型II型同源二聚體NAD-IDHs從Ostreococcus
lucimarinus CCE9901 IDH（OlIDH）和Micromonas SP。RCC299（MiIDH），和新穎的單體
非NAD IDHs從彎曲桿菌屬。FOBRC14 IDH（CaIDH）和彎曲桿菌curvus（CcIDH）的
報告首次。的同二聚體OlIDH和單體CaIDH由尺寸決定
排阻層析和MALDI-TOF / TOF質譜。所有四個IDHs被
證明是NAD1特有的，因為OlIDH，MiIDH，CaIDH和CcIDH顯示的99倍，224倍
，61 倍和37倍的喜好forNAD1 overNADP1分別。推定的輔酶鑑別
氨基酸（Asp326 / Met327在OlIDH，Leu584 / Asp595在CaIDH）進行了評價，而所述輔酶
的兩個突變體的特異性，OlIDH R326H327和CaIDHH584R595，完全從NAD1逆轉
到NADP1。詳細的生化特性，包括最佳反應pH和溫度，
熱穩定性，和金屬離子的效果，OlIDH和CaIDH被進一步研究。進化
OlIDH，CaIDH之間的聯繫，以及所有其他形式的IDHs進行了描述和討論
徹底。

結果 (繁體中文) 3:

nad1使用异檸檬酸脫氫酶的祖先性狀（IDH），和nadp1錶型產生
進化作為一種古老的適應活動。然而，沒有nad1具體IDH已II型
IDH和單體IDH中發現。在這項研究中，新的II型的同型二聚體和异檸檬酸脫氫酶從Ostreococcus
lucimarinus cce9901 IDH（olidh）和Micromonas sp. rcc299（miidh），和新的單體
儘管從空腸彎曲菌和fobrc14 IDH（caidh）和空腸彎曲curvus（ccidh）是
首次報導。
的尺寸排阻色譜和MALDI-TOF／TOF質譜法測定同型二聚體和單體caidh olidh。所有四
IDH被證明是nad1具體，olidh以來，miidh，caidh和ccidh顯示99倍，224倍，
61倍和37倍fornad1 overnadp1偏好，分別。假定
輔酶鑒別胺基酸（asp326 / met327在olidh，leu584 / asp595在caidh）進行評估，和兩種突變體的輔酶
特异性，olidh r326h327和caidhh584r595完全逆轉，從
到nadp1 nad1。詳細的生化特性，包括最佳反應的酸堿值和溫度熱穩定性，和金屬離子的影響，並進一步研究了caidh olidh。進化
olidh之間的連接，caidh 100，和所有其他形式進行了描述和討論
徹底。