To further examine the MRN-CtIP rel

To further examine the MRN-CtIP relationship, we used murine cells harboring loxP-flanked (floxed) conditional allele of Mre11 (Mre11cond/−) in which RAD50 and NBS1 protein levels are reduced when Mre11 is rendered deficient (Mre11−/−) (Supplementary Fig. 1). In MRN-deficient cells (Mre11−/−), CtIP protein levels were markedly reduced (Supplementary Fig. 2). By contrast, BRCA1 levels were unaffected. CtIP levels were also assessed in murine cells expressing Mre11H129N (Mre11H129N/−) (Supplementary Fig. 1), a targeted germline missense mutation causing defective Mre11 nuclease activities while preserving integrity of the MRN complex. No effect on CtIP levels was observed in these cells (Supplementary Fig. 2).

結果 (繁體中文) 1:

為了進一步審查 MRN CtIP 的關係，我們使用了窩藏 Mre11 loxP 兩側 (floxed) 條件等位基因的小鼠細胞 (Mre11cond/−) 中的 RAD50 和 NBS1 蛋白水準下降 Mre11 呈現缺 (Mre11−/−) (補充圖 1) 時。在 MRN 缺陷細胞 (Mre11−/−)，CtIP 蛋白水準顯著降低 (補充圖 2)。相比之下，brca1 基因水準受到影響。CtIP 水準同時也評估在小鼠細胞表達 Mre11H129N (Mre11H129N/−) (補充圖 1)，同時保留完整的 MRN 複雜造成缺陷的 Mre11 核酸酶活動的有針對性的種系錯義突變。在這些細胞 (補充圖 2) 觀察了對 CtIP 水準沒有影響。

結果 (繁體中文) 2:

為了進一步考察MRN-CtIP的關係，我們用小鼠細胞窩藏MRE11（Mre11cond / - ）的loxP的兩側（兩側裝接loxP）有條件的等位基因，其中當MRE11呈現不足RAD50和NBS1蛋白水平降低（MRE11 - / - ）（補充圖1）。在MRN缺陷型細胞（MRE11 - / - ），CtIP蛋白水平顯著降低（附圖2）。與此相反，BRCA1基因水平不受影響。CtIP程度進行評估在表達Mre11H129N（Mre11H129N / - ）鼠細胞（補充圖1），有針對性的種系錯義突變導致缺陷MRE11核酸酶活同時保留MRN複合的完整性。觀察到這些細胞中（補充圖2）上CtIP水平沒有影響。

結果 (繁體中文) 3:

為了進一步研究MRN CtIP的關係，我們用小鼠細胞攜帶loxP的兩側（floxed MRE11基因（條件）mre11cond /−），Rad50 NBS1蛋白水准降低時呈現不足（MRE11 MRE11−/−）（補充圖1）。在MRN缺陷細胞（MRE11−/−）、CtIP蛋白水准顯著降低（補充圖2）。對比，BRCA1水准未受影響。CTIP水准也在表達mre11h129n小鼠細胞進行評估（mre11h129n /−）（補充圖1），有針對性的基因的錯義突變導致有缺陷的MRE11核酸酶活性而保留的MRN複合物的完整性。在這些細胞中觀察到CtIP水准無影響（補充圖2）。