A combination of pure hypochlorous

A combination of pure hypochlorous acid solution 0.01% as the irrigation solution and NPWT was used to treat a patient with acute necrotizing fasciitis. A line diagram of the equipment is shown on Figure 1. Before treatment, the wound area was cleansed, the wound debrided, and the skin dried. A foam dressing (V.A.C. GranuFoam, KCI, San Antonio, TX) was sized and placed in the wound. A separate inflow tube (ie, an intravenous extension with a port) was placed on and through the foam. The adhesive drape was attached and placed over the entire area, including the foam. The area around the tubing was sealed with a skin barrier ointment (Stomadhesive Paste, ConvaTec, Skillman, NJ). The NPWT device was then turned on and adjusted from 50-125 mm Hg suction. The irrigation solution (5 mL) was instilled via syringe through the inlet-port into the wound bed with the vacuum turned on (Figure 2). Activity of the irrigation solution against alpha-hemolysin toxin of S. aureus was tested by cytotoxicity assay. Human lung epithelial cells (A549, ATCC CCL 185) were grown in F12K cell culture medium supplemented with 10% fetal bovine serum (Life/Invitrogen, Carlsbad, CA) and 100 IU/mL penicillin/100 µg/mL streptomycin (Mediatech Inc, a Corning subsidiary, Manassas, VA). Assays were performed using F12K medium with different concentrations of purified toxin by measuring the reduction of MTS tetrazolium compound into formazan that is soluble in cell culture medium. On the day before the assay, 5000 cells/well were seeded in a flat-bottom 96-well plate. One ug/mL alpha-hemolysin toxin (Sigma Aldrich, St. Louis, MO) from S. aureus was incubated with a series of irrigation solution dilutions for 1 hour. Excess irrigation solution was inactivated by adding an equal volume of 20 mM methionine for 1 hour at room temperature and added to the cells for 16 hours at 37°C with 5% CO2. At the end of the experiment, cell viability was determined with an assay (CellTiter 96 AQueous One Solution Cell Proliferation Assay [MTS], Promega, Madison, WI). Inactivation of streptokinase was determined by clot formation enzymatic assay (Sigma Aldrich, St. Louis, MO), whereby thrombin converts the soluble fibrinogen into soluble fibrin. In the presence of streptokinase enzyme from S. pyogenes, the insoluble fibrin is converted into soluble fibrin fragments. Several hours before the study, streptokinase (175 U/mL) was incubated with the irrigation solution for 1 hour, followed by inactivation of excess irrigation solution by adding an equal volume of 20 mM methionine for 1 hour at room temperature. In a separate glass tube, fibrinogen solution containing borate buffer, gelatin diluent, and plasminogen were mixed by swirling, and then equilibrated at 37° C for 3 minutes. Irrigation solution and methionine-treated streptokinase was added to the solution, mixed by swirling, and equilibrated at 37° C for 1 minute prior to the addition of thrombin. The solution was mixed by swirling and equilibrated at 37° C for approximately 2-3 minutes to allow for clot formation. A 4 mm glass bead was added to the top of the reaction mixture, and the time for the glass bead to touch the bottom of the tube was observed.

- See more at: http://www.woundsresearch.com/article/treatment-acute-necrotizing-fasciitis-using-negative-pressure-wound-therapy-and-adjunctive-n#sthash.VzB7Pyak.dpuf

結果 (繁體中文) 1:

純次氯酸溶液 0.01%作為沖洗液和 NPWT 組合用來治療急性壞死性筋膜炎患者。圖 1 顯示裝置線圖。治療前，傷口面積得潔淨、 傷口清創，和皮膚乾燥。泡沫敷料 (V.A.C.GranuFoam，氯化鉀，San Antonio，TX) 是大小和放置在傷口處。單獨的流入管 (即靜脈與埠擴展) 放在和通過泡沫。膠粘劑的懸垂性是附加和放置在整個地區，包括泡沫。周圍的油管區被密封的皮膚屏障軟膏 (Stomadhesive 粘貼、 康維德專題、 爾曼，NJ)。NPWT 設備被打開，然後調整從 50-125 毫米汞柱吸。沖洗液 (5 毫升) 被灌輸通過注射器通過進氣道傷口床與真空開啟 (圖 2)。活動的沖洗液抗 α-溶血素的金黃色葡萄球菌毒素的毒性測試。人肺上皮細胞 (A549、 ATCC CCL 185) 輔以 10%胎牛血清 (生活/Invitrogen，卡爾斯巴德，CA) 和 100 國際單位/毫升青黴素/100 微克/毫升鏈黴素 (Mediatech 公司，康寧公司的子公司，馬納薩斯，VA) 的 F12K 細胞培養基中生長。檢測方法進行使用 F12K 介質用不同濃度的純化毒素通過測量 MTS 四氮唑化合物還原成是可溶性細胞培養基中的結合。含量測定的前一天，5000 細胞/井被播種在平底 96 孔板。一個微克/毫升 α-溶血素毒素 (西格瑪奧德里奇，聖 Louis，MO) 從金黃色葡萄球菌一起進行培養，一系列的灌溉溶液稀釋為 1 小時。過量灌溉解決方案是通過添加 20 毫米蛋氨酸等體積在室溫 1 小時滅活和補充到細胞中，在 37 ° C，5 %co2 的 16 個小時。在實驗結束，測定 (CellTiter 96 水一個解決方案淋巴細胞增殖 [MTS]，麥格，麥迪森，威斯康辛州) 測定細胞活力。失活的鏈激酶測定血凝塊形成酶法測定 (西格瑪奧德里奇，聖 Louis，MO)，藉以凝血酶可溶性纖維蛋白原轉化可溶性纖維蛋白。在鏈激酶酶從鏈球菌，不溶性的纖維蛋白轉化為可溶性纖維蛋白片段。幾個小時才研究，鏈激酶 (175 U/mL) 是灌溉溶液孵育 1 小時，由過剩沖洗液滅活依次加入等體積的 20 毫米蛋氨酸室溫 1 小時。在一個單獨的玻璃管，纖維蛋白原溶液含有硼酸鹽緩衝液，明膠稀釋劑和纖溶酶原啟動了由紛飛，混合，然後在 37 ° C 3 分鐘。沖洗液和蛋氨酸治療鏈激酶是添加到解決方案中，通過旋轉，混合和平衡在 37 ° C 的凝血酶的 1 分鐘。該解決方案是通過旋流混合並平衡在 37 ° C 的大約 2-3 分鐘，讓血栓的形成。4 毫米玻璃微珠添加到頂部的反應混合物，並觀察玻璃珠去觸摸試管底部的時間。-查看更多: HTTP://www.woundsresearch.com/article/treatment-acute-necrotizing-fasciitis-using-negative-pressure-wound-therapy-and-adjunctive-n#sthash.VzB7Pyak.dpuf

結果 (繁體中文) 2:

純次氯酸溶液0.01％作為灌溉溶液和NPWT的組合物用於治療與急性壞死性筋膜炎的患者。該設備的線路示意圖如圖1所示。治療前，傷口面積清洗，傷口清創，和皮膚乾燥。泡沫敷料（VAC GranuFoam，KCl，聖安東尼奧，德克薩斯州）是大小和放置在傷口上。一個單獨的流入管（即，靜脈內延伸與端口）置於並通過泡沫。粘合劑披覆附著和放置在整個區域，包括泡沫。圍繞管子的面積密封與皮膚屏障軟膏（Stomadhesive粘貼，ConvaTec的，斯基爾曼，新澤西州）。該設備NPWT然後打開並從50-125毫米汞柱吸調整。灌溉溶液（5毫升）中，通過注射器通過進口端口進入床與真空傷口滴注接通（圖2）。針對金黃色葡萄球菌的的α-溶血素毒素的灌溉溶液的活性通過細胞毒性試驗測試。人肺上皮細胞（A549，ATCC CCL 185）生長在補充有10％胎牛血清（生活/ Invitrogen公司，卡爾斯巴德，CA）和100IU / mL青黴素/ 100微克/ mL鏈黴素的F12K細胞培養基（Mediatech公司公司，康寧子公司，弗吉尼亞州馬納薩斯）。測定法用不同濃度的純化的毒素的F12K培養基中，通過測量的MTS四唑鎓化合物的還原成甲臢可溶於在細胞培養介質中進行。在測定前一天，5000個細胞/孔接種於平底96孔板中。一微克/毫升的α-溶血素毒素（Sigma Aldrich公司，聖路易斯，密蘇里州）從金黃色葡萄球菌孵育一系列灌溉溶液稀釋1小時。過量灌溉溶液失活，在室溫下加入20毫甲硫氨酸等體積1小時，並加入到細胞中16小時，在37℃，5％CO 2。在實驗結束時，細胞存活率用一種檢測試驗來確定（的CellTiter 96 AQueous單溶液細胞增殖測定的MTS]，Promega公司，麥迪遜，WI）中。鏈激酶的失活是由血塊形成酶測定（Sigma Aldrich公司，聖路易斯，密蘇里州），由此凝血酶轉換可溶性纖維蛋白原轉變成可溶的血纖維蛋白測定。在從化膿性鏈球菌鏈激酶酶的存在下，不溶性的血纖維蛋白轉變成可溶的血纖維蛋白的片段。在研究前幾個小時，鏈激酶（175單位/毫升），孵育1小時，在室溫下加入20毫甲硫氨酸等體積1小時的灌溉溶液中，隨後的過量灌溉溶液失活。在一個單獨的玻璃管，含有硼酸鹽緩衝液，明膠稀釋劑和纖溶酶原纖維蛋白原溶液通過渦旋混合，然後平衡在37℃下進行3分鐘。灌溉溶液和甲硫氨酸處理鏈激酶加入到該溶液中，通過渦旋混合，並平衡在37℃，然後加入凝血酶1分鐘。將溶液混合由旋流和平衡在37℃下進行大約2-3分鐘，以使凝塊形成。一個4毫米的玻璃珠加入到該反應混合物的頂部，並且觀察到的時間在玻璃珠觸摸試管底部。-詳見於：

結果 (繁體中文) 3:

一個組合的純次氯酸酸解決0.01%的灌溉的解決辦法和npwt是用來治療病人的急性足多。 一個路線圖的裝備是顯示於圖1。 治療前,傷口的領域是清洗,傷口debrided、皮膚乾燥。 一個泡沫選礦(V.A.C. granufoam、裝、San Antonio,TX)的大小和放置在傷口。一個單獨流入管(IE,一個與靜脈延長一個端口)放在和通過的泡沫。 德拉佩的粘附和放在整個地區,包括泡沫。 該區附近的管材是密封的皮膚障膏(stomadhesive膏、convatec、希爾曼,NJ)。 《npwt設備,然後打開和調整至50-125毫米汞Hg吸。灌溉的解決辦法(5毫升)是通過注射器通過注入的進水口的端口的傷口床的真空,打開(圖2)。 活動的灌溉解決對阿爾法-hemolysin毒素,S.葡萄球菌是測試的細胞含量。 人類龍上細胞(a549應急信貸額度,中心185)是生長在f12k細胞培養基輔以10%胎兒牛血清(生活/invitrogen,斯、CA)和100IU/ml青霉素/100g/ml鏈(mediatech INC,一個科寧附屬、馬納薩斯,Va)。 化驗所進行使用f12k中等與不同濃度的淨化毒素的測量,減少MTS性四氮唑復合成formazan即溶在細胞培養基。 此前一天的含量,5000細胞/好種子是在一個平底板96-好。 一個微克/毫升alpha-hemolysin毒素(西格瑪Aldrich,聖路易斯、MO)從S葡萄球菌孵化,是一系列的灌溉解決液,1小時。 超過灌溉的解決辦法是停止生產量增加了一個平等的20毫米蛋氨酸,1小時在室溫的細胞和由為16小時37C,5%CO2。在這次試驗,細胞上的可行性的決心,一個含量(celltiter96水汽一個解決方法細胞擴散含量[MTS]將、麥迪遜WI)。 ”,他們是由血栓形成酶含量(西格瑪Aldrich,聖路易斯、MO),據此thrombin轉換的溶型入水溶性纖維。 在他們酶從S.