Assay of mushroom tyrosinase activi

Assay of mushroom tyrosinase activity
In order to assay the inhibitory action of M. grandiflora L. flower extract (final concentration 10, 15, 20%; v/v) on mushroom tyrosinase, dose-dependent inhibition experiments were carried out in triplicate, as described previously,with a minor modification [32]. Briefly, 10 μL of aqueous solution of mushroom tyrosinase (200 units)
was added to a 96-well microplate, in a total volume of 200 μL mixture containing 5 mM L-DOPA which is dissolved in 50 mM phosphate buffer (pH 6.8). The assay mixture was incubated at 37°C for 30 min. Following incubation,The amount of dopachrome produced in the reaction mixture was determined spectrophotometrically at 490 nm (OD490) in a microplate reader. The inhibition percentage at three doses for each experiment was calculated by the following equation: inhibition percentage of tyrosinase activity (%) = (B-A)
A× 100, where B is the mean of the measured OD490 values of the blank control,
and A is the mean of the measured OD490 values for the M. grandiflora L. flower extract treated group.

結果 (繁體中文) 1:

蘑菇酪氨酸酶活性的測定為了測定廣玉蘭的生長抑制作用 L.花提取物 (終濃度 10，15，20%; v/v) 對蘑菇酪氨酸酶，劑量依賴性抑制實驗一式三份，前面所述，稍作修改 [32]。簡單地說，10 μ L 的水溶液的蘑菇酪氨酸酶 (200 個單位)被添加到 96 孔板微孔板中含有 5 毫米左旋多巴的溶解在 50 毫米磷酸鹽緩衝液 (pH 6.8) 200 μ L 混合物總體積。測定混合培養在 37 ° C，30 分鐘。後孵化，多巴色素反應混合物中產生的大量堅定的分光光度法在 490 nm (OD490) 在酶標儀。在每個實驗的三個劑量的抑制率由下面的公式計算: 抑制酪氨酸酶活性 (%) 的百分比 = (B-A) A × 100，其中 B 是測量 OD490 值與空白對照的意思，A 是 M.廣玉蘭花提取物治療組的測量 OD490 值的平均值。

結果 (繁體中文) 2:

測定蘑菇酪氨酸酶的活性
為了測定M的抑製作用玉蘭L.花提取物（最終濃度10，15，20％;體積/體積）上的蘑菇酪氨酸酶，劑量依賴性抑制實驗一式三份進行，如如前所述，用一個小的修改[32]。簡言之，蘑菇酪氨酸酶（200單位）的水溶液10微升
加到96孔微板中的200μL的混合物含有5mM L-DOPA其溶於50mM磷酸鹽緩衝液（pH 6.8）的總體積。測定混合物在37℃下30分鐘。孵育後，多巴色素的反應混合物中產生的量在酶標儀490nm處（OD490）分光光度測定。在三個劑量為每個實驗的抑制百分比計算由以下等式：酪氨酸酶的活性（％）=（BA）的抑制百分比？A×100，其中B是空白對照的測量OD490值的平均值，
而A是用於分枝玉蘭L.花提取物治療組所測量的OD 490值的平均值。

結果 (繁體中文) 3:

為了對蘑菇酪氨酸酶活性測定
廣玉蘭L.花提取物的抑制作用的測定（終濃度為10，15，20%；V / V）對蘑菇酪氨酸酶，劑量依賴性的抑制實驗，一式三份進行，如前所述，有一個小的修改[ 32 ]。簡單地說，蘑菇酪氨酸酶（200個組織）的水溶液的10個昇加入96孔板，在總量的200μL混合物含有5毫米左旋多巴是溶解在50 mM磷酸鹽緩衝液（pH 6.8）。測定混合物中孵育37°C 30分鐘孵育後，在490 nm的分光光度法測定了反應混合物中生成多巴（OD490）在酶標儀。通過以下公式計算在每個實驗的三個劑量的抑制率：對酪氨酸酶活性的抑制率（%）=（B-A）
一×100，其中B是的空白對照實測OD490值的平均值，
和為廣玉蘭L.花提取物治療組的量測OD490值的平均值。